1. 预处理：拆除色谱柱两端的堵头，检查柱接头是否洁净，避免杂质进入流路。
2. 低流速冲洗：
- 新柱先用10%甲醇/乙腈-水溶液，以 0.2~0.3 mL/min 流速冲洗 30 min，置换柱内保存液（多为高浓度甲醇/乙腈）。
- 再用纯甲醇/乙腈，以相同低流速冲洗 60~90 min，冲洗体积不少于 10 倍柱体积。
3. 平衡：切换至目标流动相，以分析流速冲洗 30~60 min，直至基线平稳，即可进样分析。
 
注意事项
 
1. 溶剂兼容性：活化溶剂需与色谱柱保存液互溶，避免直接用高水相替换高有机相，防止柱填料塌陷。
2. 流速控制：全程先低后高，严禁瞬间大流速冲击色谱柱，防止柱床松动。
3. pH 范围：严格遵循色谱柱标注的 pH 耐受范围（如 C18 柱通常 pH 2~8），避免强酸强碱损伤键合相。
4. 污染防控：流动相需经 0.45 μm 滤膜过滤并超声脱气，样品需过滤，防止颗粒杂质堵塞柱头。
5. 保存要求：活化后若长期不用，需用纯甲醇/乙腈冲洗后密封保存，放置在阴凉干燥处。